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적합한 기술과 서비스를 제공합니다.
RNA expression like you've never seen it before
RNA In Situ Hybridization
ACD는 조직 내에서 single cell 수준으로 유전자 발현을 시각화 할 수 있는 혁신적인 분석법을 제공합니다.
DNA, RNA 및 단백질과 같은 biomarker는 기본적인 세포 기능을 이해하고, 임상 질환을 진단하고, 최적의 치료법을 확인하는 강력한 도구로 활용됩니다. 특히, RNA는 유기체에서 발생하는 유전자 발현 변화의 이상적인 지표로 활용되고 있습니다.
RNAscope은 target-specific signal을 증폭시키기 위한 독점 probe design 알고리즘을 사용하여 세포 내에서 target RNA를 검출하는 새로운 in situ hybridization (ISH) 분석법으로 morphology와 분자적 분석을 동시에 제공함으로써 세포 간 상호 작용을 더 잘 이해할 수 있도록 하였습니다.
RNAscope Probe는 특정 Target RNA서열에 결합하는 site와 signal amplification 단계에 사용되는 preamplifier에 결합하는 총 두개의 site로 구성되어 있습니다. 한쌍의 Z probe (double Z)가 결합을 하여야만 preamplifier가 결합하도록 되어 있어 비특이적 반응을 최소화할 수 있습니다.
Double Z target probes hybridize to the RNA target (~1kb)
Pre-amplifiers hybridize to the 28-base binding site formed by each double Z probe
Amplifiers are then binding to the multiple binding sites on each preamplifier.
Labeled probes, containing a fluorescent molecule or chromogenic enzyme, bind to the numerous binding sites on each amplifier.
RNAscope : A Novel In Situ RNA Analysis Platform for Formalin-Fixed Paraffin-Embedded Tissues
Wang F,Flanagan J, Su N, Wang LC, Bui S, Nielson A, Wu X, Vo HT, Ma XJ, Luo Y (2012)
J of Mol Diagnostics, 14(1):22-29PMID: 22166544 doi:10.1016/j.jmoldx. 2011.08.002
Automated Quantitative RNA In Situ Hybridization for Resolution of Equivocal
and Heterogeneous ERBB2 (HER2) Status in Invasive Breast Carcinoma
Wang Z, Portier BP, Gruver AM, Bui S, Wang H, Su N, Vo HT, Ma XJ, Luo Y, Budd GT,
Tubbs RR(2013) J of MolDiagnostics, 15(2):210-219PMID: 23305306
doi:10.1016/j.jmoldx. 2012.10.003
Permeabilize
Hybridize
Amplify
Visualize
Quantify
약 8시간 내 결과 확인 가능합니다.
Sample을 slide에 고정 한 후 RNA를 측정하기 때문에 세포 모양 유지하면서 RNA 발현 정도를 동시에 확인 가능합니다.
Oligonucleotide probe를 Target RNA에 붙이고 증폭과정을 거치기 때문에 low level signal에서도 측정 가능합니다.
Signal 증폭으로 Sensitivity를 높여 single molecule, 즉 dot으로 detection 하여 눈으로 확인 할 수 있습니다. (Single dot = Single molecule
Target RNA sequence에 맞추어 probe를 제작 가능합니다.
다양한 유전자와 다양한 종, 다양한 조직에 적용가능합니다.
Formlin-fixed, parafiin -embedded (including archival FFPE) | Tissue-Microarrays (TMA) |
Fixed-frozoen tissue | Adherent cells |
Fresh-frozen tissue | Peropheral Blood Mononuclear Cells (PBMCs) |
ACD 테크놀로지를 활용하기 위한 가장 중요한 요소 중 하나는 이미지의 분석입니다. 이를 위하여 ACD는 강력한 Image Analysis Platform을 설계하는 Indica Lab과 협력하고 있습니다. Indica Lab의 HALO software는 RNAscope image에서 유전자 발현을 single cell 수준에서 정량적으로 측정하여 객관적이고 정확한 데이터를 제공할 수 있습니다.
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